• facebook
  • linkedin
  • youtube

Chinhu chakatanhamara chePCR maitiro isimba rayo rakakura rekusimudzira uye yakanyanya kunzwisiswa.Kuti tivandudze mashandiro ePCR uye kugona kuona, isu takazvipira kuvandudza PCR amplification kugona uye kuona senitivity, asi musoro uri mukuyedza.Nhema dzenhema dzinowanzoitika, uye shoma shoma yemuenzaniso wekusvibiswa-muchinjika kana PCR kusvibiswa kwechigadzirwa kunogona kukonzera manyepo mukuyedza.

Mhando shanu dzePCR chigadzirwa kusvibiswa

Pane zvikonzero zvakawanda zvekusvibiswa kwePCR, izvo zvinogona kukamurwa muzvikamu zvinotevera:

1. Muchinjikwa-kusvibiswa pakati pemienzaniso

1.1

Specimen kusvibiswa kunonyanya kukonzerwa nekusvibiswa kwemudziyo wekuunganidza mufananidzo, kana kuti mufananidzo wacho waiswa, unobuda kunze kwemugaba nekuda kwekuvharwa kwechisimbiso, kana kuti mufananidzo wacho unonamirwa kunze kwemudziyo, izvo zvinokonzera kusvibiswa;Kusvibiswa kunotungamirira kukusvibiswa pakati pezvienzaniso;mamwe ma microbial specimens, kunyanya mavhairasi, anogona kupararira neaerosols kana kuumba aerosols, zvichikonzera kusvibiswa.

2. PCR reagent kusvibiswa

Chikonzero chikuru ndechekuti panguva yekugadzirira kwePCR reagents, pfuti yemuenzaniso, mudziyo, mvura yakasvibiswa kaviri uye mamwe magadzirirwo akasvibiswa nePCR nucleic acid template.

1.2

3.Cloning plasmid kusvibiswa

1.3

Mumamolecular biology marabhoritari uye mamwe marabhoritari anoshandisa maplasmid akaumbwa sezvidzoreso zvakanaka, dambudziko rekusvibiswa kweplasmid rakagadzirwa rinowanzoitika.Nekuti zvirimo zve cloning plasmid muhuwandu hweyuniti zvakanyanyisa, uye mamwe maturusi uye reagents zvinodiwa mukucheneswa, uye plasmid iri mumasero mapenyu inogona kunge yakasvibiswa nekuda kwekukura kwakasimba uye kugona kubereka kwemasero mapenyu.

4.Kusvibiswa kwezvinhu zvakasimbiswa

Kusvibiswa kwezvigadzirwa zvakasimudzirwa ndiro dambudziko rinonyanya kusvibiswa mukuitwa kwePCR.Nekuti huwandu hwekopi yePCR chigadzirwa yakakura (kazhinji 1013 makopi/ml), iyo yakakwira zvakanyanya kupfuura muganhu wePCR yekuona kopi nhamba, shoma shoma yekusvibiswa kwePCR chigadzirwa inogona kukonzera manyepo.

1.4

5.Aerosol kusvibiswa

1.5

Kusvibiswa kweaerosol ndiyo inonyanya kusvibiswa nzira yePCR zvigadzirwa, uye zvakare iri nyore kufuratirwa.Inoumbwa nekukweshana pakati pemvura pamusoro nemhepo.Kazhinji, kusvibiswa kweaerosol kunogona kuumbwa kana chivharo chavhurwa, kana sampu ichishuvira, kana kunyangwe iyo chubhu inozungunuswa zvine simba.Maererano nekuverenga, aerosol particle inogona kuva ne 48,000 makopi, saka kusvibiswa kunokonzerwa nayo idambudziko rinofanirwa kutarisirwa.

Kunyanya, marabhoritari ekuyedza anowanzo shandisa iwo maviri maprimers kuyedza imwe gene.Nekufamba kwenguva, huwandu hukuru hwekusvibiswa kwechigadzirwa chePCR huchaitika munzvimbo yerabhoritari.Kana kusvibiswa kwakadaro kwaitika, zvakaoma kuibvisa munguva pfupi.

Kune marudzi matatu ekutanga ekusvibiswa, tinogona kushandisa nzira dzinoshanda kuti tidzivise, asi kusvibiswa kunokonzerwa nePCR zvigadzirwa zvakaoma kudzivirira, kunyanya pakuvakwa kwema laboratori asingasviki ePCR.Muchiitiko chePCR, apo chiputi chinosveta uye chichivhuvhuta mvura, uye PCR chubhu chivharo chinovhurwa, aerosol ichaumbwa.Mamorekuru eDNA anotakurwa neaerosol (aerosol imwe inogona kutakura makumi ezviuru zveDNA) yakaoma kubvisa nekuti anoyangarara mumhepo.Kamwe denderedzwa rinotevera rekuedzwa kwePCR raunzwa, manyepo anozoitika.

Sezvinoratidzwa mumufananidzo uri pazasi, iyo yakaipa kutonga yakasimudzawo bhendi rinoenderana rekufarira:

1.6

Chikamu chekutanga chenyaya iyi yePCR kusvibiswa nekudzivirira inounzwa pano.Nyaya inotevera ichakuunzira chikamu chechipiri "Kudzivirira kusvibiswa kwePCR chigadzirwa", saka ramba wakatarisa!


Nguva yekutumira: Jul-25-2017